Анализ мокроты больного на туберкулез

Содержание
  1. Анализ мокроты на туберкулез: правила сбора в домашних условиях
  2. Как собирается мокрота для анализа
  3. Что предпринять если не получается собрать мокроту
  4. Показания для сдачи мокроты на анализ
  5. Противопоказания
  6. Плюсы и минусы
  7. Методы исследования мокроты на микобактерии туберкулеза
  8. Мокрота при туберкулезе
  9. Цвет мокроты при туберкулезе
  10. Состав мокроты при туберкулезе
  11. Консистенция
  12. Мокрота – важный диагностический материал
  13. ПЦР мокрты на туберкулез
  14. Показания:
  15. Подготовка
  16. Интерпретация результатов анализа мокроты на туберкулез
  17. Посев мокроты на туберкулез
  18. Инструкции по сбору мокроты на туберкулез
  19. Анализ мокроты на туберкулез: отрицательный и положительный
  20. Пути заражения и передачи туберкулеза
  21. Анализ мокроты больного туберкулезом
  22. Методы анализа мокроты на туберкулез
  23. Современные методы анализа биоматериала
  24. по теме
  25. Метод исследования мокроты на туберкулёз
  26. Общие сведенья о туберкулёзе
  27. Ценность лабораторной диагностики мокроты
  28. Сбор мокроты
  29. Что нужно знать при сборе мокроты?
  30. Методы диагностики
  31. Макроскопический анализ
  32. Микроскопический анализ
  33. Иммуноферментный анализ
  34. Автоматизированная система ВАСТЕС MGIT 960
  35. Флуоресцентная микроскопия
  36. Полимеразная цепная реакция
  37. Культивирование на средах
  38. Заключение

Анализ мокроты на туберкулез: правила сбора в домашних условиях

Анализ мокроты больного на туберкулез

В здоровом организме бронхи вырабатывают слизь без цвета и запаха, которая необходима для того, чтобы очищать дыхательные пути от попадающих туда микроскопических частичек пыли, вдыхаемого мусора и микробов.

Механизм очищения органов дыхания очень прост: реснички эпителия, устилающего их, поднимают слизь наверх вместе с чужеродными частицами.

В норме такой мокроты вырабатывается очень мало, поэтому здоровый человек не замечает ее отделения, и она проглатывается вместе со слюной.

Но на фоне любого воспалительного процесса, сопровождающего, какое-либо заболевание дыхательных путей, в том числе и туберкулеза, количество продуцируемой бронхами мокроты значительно возрастает.

Это связано, в первую очередь, с раздражением бокаловидных клеток, а также, при присоединении воспалительного процесса, когда клетки иммунной системы организма начинают поглощать патогенные микроорганизмы, образуются гнойные массы. Они также формируют отделяемое в виде мокроты при заболеваниях дыхательных путей.

С помощью кашля организм выводит эту жидкость – именно с помощью нее диагностируются многие бронхо — легочные патологии и выявляется степень и характер течения воспалительного процесса.

[attention type=yellow]

Количество выделяемой при влажном кашле мокроты также указывает на некоторые особенности течения заболевания. При этом она может, не выводится посредством кашля совсем (трудноотделяемая мокрота) или, наоборот, биоматериал можно собрать без каких-либо трудностей.

[/attention]

Два самых распространённых исследования этого отделяемого – это бактериоскопия и посев: именно эти два этапа позволяют провести точную диагностику заболевания, вызвавшего повышенное отделение мокроты и как следствие, влажный кашель с рядом сопутствующих симптомов.

Как собирается мокрота для анализа

  1. Для начала необходимо позаботиться о контейнере – его можно купить в любой аптеке. Это специализированная емкость для сбора мокроты: она стерильна, с широким горлышком и крышкой. Также контейнер могут выдать в медицинском учреждении. Необходимый объем биоматериала для исследования – 5мл, поэтому емкость должна быть соответствующая.
  2. Самым подходящим временем для сбора мокроты являются утренние часы, поскольку за время ночного сна скапливается достаточное количество и собрать ее гораздо легче. Однако бывают такие обстоятельства, когда мокрота забирается в любое время суток.
  3. Перед тем, как приступить к сбору мокроты на анализ, тщательно прополоскать ротовую полость, при этом чистить зубы перед этим нельзя.
  4. Биоматериал для анализа собирается следующим образом: сделав максимально глубокий вдох, задержать дыхание, после чего медленно выдохнуть – повторить еще раз.

    Сделав третий глубокий вдох, резко выдохнуть, как бы выталкивая воздух из лёгких, и как следует откашляться. Во время этого рот должен быть прикрыт марлевой повязкой.

  5. Контейнер необходимо придерживать у нижней губы — сплюнуть в него все содержимое, которое получилось откашлять и плотно закрыть стерильную баночку крышкой.

  6. Если после одного раза мокроты отошло очень мало, то процедуру следует повторить, для того чтобы собрать необходимое для исследования количество(5-7 мл.)

Что предпринять если не получается собрать мокроту

Для начала можно попробовать поменять положение тела при откашливании: облегчают отхождение мокроты наклоны вниз, положения, лежа на боку или на животе.

Если такие меры не привели к положительному результату, то можно принять отхаркивающие средства или сделать ингаляцию.

Отхаркивающие препараты назначает лечащий врач, и начинать принимать их необходимо за сутки до сбора мокроты (бромгексин, амбробене и другие традиционные препараты).

Совместно с приемом таких препаратов необходимо употреблять достаточно большое количество жидкости для облегчения отхождения мокроты.

Ингаляцию для этой цели делают на основе раствора соды и соли. Вдыхать такую смесь следует через небулайзер 10-15 минут(40-60 мл.). Если начинается усиленное слюноотделение, то ее нужно сплюнуть, только потом собирать мокроту.

Если не удается собрать мокроту всеми вышеперечисленными способами, то пациенту назначается процедура бронхоскопии. Еще такое исследование проводится в случаях, когда необходимо собрать секрет мокроты с бронхов, без примесей слюны и носоглоточной микрофлоры.

Процедура проводится посредством двух методик:

  • В бронхи вводится 100-200 мл. физ. раствора через вставленный катетер, после чего полученная жидкость посредством аспирации выводится обратно.
  • В просветы бронхиального дерева вводят катетер для прямой аспирации слизи.Пациенту необходимо пройти подготовку к этой процедуре: не употреблять пищу и жидкость в течение 6 часов, как правило, она назначается на утреннее время, чтобы пациенту было легче выдержать такой интервал времени. А после нее не употреблять аспириносодержащие препараты, которые обладают способностью разжижать кровь.И промывные воды, и непосредственно мокрота, полученные таким способом, используются для всех видов исследований на данном биоматериале.

Если сдача мокроты проводится в условиях стационара, то медицинский работник предоставляет пациенту специально оборудованную процедурную, консультирует по поводу процедуры сдачи и контролирует весь процесс. Также медработник подписывает контейнер с биоматериалом и отправляет его на исследование.

Показания для сдачи мокроты на анализ

Анализ мокроты на туберкулез позволяет выявить легочный тип развития заболевания. Основными показаниями для его проведения являются:

  • Кашель затяжного характера (влажный или сухой);
  • Выявленные затемнения на снимках рентгена;
  • Повышенная температура тела.

Для постановки диагноза туберкулез легких, анализ мокроты является обязательным в спектре исследований, проводимых при подозрении на данное заболевание. Обязательным исследование на инфицирование туберкулезом считается в тех случаях, когда больной больше трех месяцев страдает от сухого кашля, который не поддается никаким видам лечения.

Противопоказания

В связи с тем, что биоматериал для исследования на микобактерии берется не только при помощи непосредственного отхаркивания, но и путем бронхоскопии, данное исследование имеет противопоказания. При процедуре бронхоскопии вводится трубка в верхние органы дыхания под общей или местной анестезией. Поэтому, такая методика забора анализа противопоказана:

  • пациентам, страдающим аллергией на обезболивающие медикаменты;
  • людям с тяжелой дыхательной недостаточностью;
  • с нарушениями свертываемости крови;
  • пациентам, в ближайшие пол года перенесшим инфаркт миокарда или инсульт;
  • с такими заболеваниями, как эпилепсия и шизофрения.

Детям до 18 лет процедура бронхоскопии назначается и делается только с согласия родителей. Сама процедура является безопасной и осложнения вызывает крайне редко, но препараты, предназначенные для общей и местной анестезии, могут вызывать непереносимость и аллергические реакции. Этот вопрос необходимо обязательно обсудить перед процедурой с лечащим врачом.

Плюсы и минусы

Самым весомым плюсом этого анализа является стопроцентная точность диагностики и возможность выявления туберкулеза на ранних этапах заражения. Тест включает в себя забор нескольких проб, которые способны однозначно указать присутствие или отсутствие возбудителя в легких пациента.

Сам анализ вариативен, и проводить его можно удобным для пациента способом; данная методика выполняется в короткие сроки, и доставляет минимум дискомфорта пациенту.

Такой метод сбора анализа на микобактерии не имеет побочных воздействий на организм пациента. Нет необходимости вводить медицинские препараты или сдавать анализы крови, мочи.

По сути, сбор анализа на микобактерии происходит естественно, без особых трудностей и дискомфорта для пациента.

Часто это становится актуально, когда речь идет о малолетних детях, которые весьма негативно переносят такие диагностические процедуры.

С помощью такого информативного метода, как бронхоскопия, медики имеют возможность выявить и другие патологии небактериального характера на ранних сроках (бронхиальная астма, рак легких и т.д.).

Расширенное исследование качественного состава мокроты позволяет произвести диагностику на любом этапе развития заболевания .

Таким образом, анализ может не только подтвердить или опровергнуть диагноз туберкулез, но и установить причину возникновения тревожной симптоматики.

[attention type=red]

К минусам можно отнести достаточно долгое ожидание результата анализа. На это есть две главные причины: многостороннее обследование биоматериала, включающее в себя бактериологический анализ и посев мокроты на питательные типы сред, который и является самым долгосрочным видом исследования. Время ожидания может растянуться от 3 недель до двух месяцев.

[/attention]

К отрицательной стороне также можно отнести многократное проведение бронхоскопии при подозрении на заражение туберкулезом, при отсутствии главного симптома – кашля.

Методы исследования мокроты на микобактерии туберкулеза

После того как биоматериал поступил на исследование в лабораторию, специалист в первую очередь, занимается его визуальной оценкой.

При тяжелых формах туберкулеза, например, в мокроте наблюдаются вкрапления крови или кровяные сгустки.

Но такое отделяемое не является стопроцентным показателем заражения туберкулезом – наличие крови в мокроте может говорить и о крупозной пневмонии, и об опухолевых процессах, о бронхоэктатической болезни.

Если все же речь идет о туберкулезном заражении, то при дальнейшем исследовании в мокроте будут обнаружены микобактерии. В современной медицине используются две основных проверенных временем методики лабораторного исследования мокроты: бактериоскопическая и культуральная (биологическая).

Бактериоскопия применяется в диагностике туберкулеза уже более ста лет.

Она включает в себя макроскопическое описание, микроскопическое исследование – при нем выявляются эритроциты, волокна легочной ткани, коралловидные, спириллы Куршмана и т.д.

В мокроте зараженного туберкулезом пациента обнаруживаются, помимо микобактерий, темные фрагменты (зерна) – это частицы старых, распадающихся очагов.

Этот метод используется не только для выявления и диагностики такого коварного заболевания, как туберкулез, также он помогает в выборе рациональных схем химиотерапии и оценке их клинической эффективности.

Бактериологическая диагностика проводится в таком порядке:

  1. Обработка материала, поступившего в лабораторию.
  2. Микроскопическое исследование мокроты.
  3. Посев мокроты на туберкулез.
  4. Идентификация микроорганизма при помощи бактериологического и биохимического тестирования.
  5. Определение лекарственной чувствительности туберкулезной палочки.

Проводится исследование мокроты на туберкулез с помощью двух методов: обычная (простая) бактериоскопия и метод флорации. Простой метод включает в себя приготовление мазков из комочков мокроты – их помещают между двумя предметными стеклами. Затем одна часть биоматериала окрашивается по Грамму на общую флору, а другая – на микобактерии туберкулеза.

С начала 90-х годов многие современные лаборатории стали использовать в диагностике туберкулеза флюоресцентную микроскопию, основанную на кислотоустойчивости микобактерии. Под воздействием ультрафиолетового излучения туберкулезные палочки проявляются в ярко-желтом цвете на черном фоне.

Культуральный метод включает в себя такие диагностические процедуры:

  1. Удаление белковых масс путем обработки мазка разжижающими веществами.
  2. Удаление сопутствующей бактериальной формы с помощью деконтаминации образца.
  3. Встряхивание.
  4. Отстаивание смеси.
  5. Помещение в холодную центрифугу.
  6. После этого содержимое пробирки отбирается на посев:
    • агаровой среды,
    • плотной яичной среды,
    • бульонного культивирования автоматизированного типа.

Культуральный посев мокроты повышает точность исследования в разы — при более легких степенях развития заболевания, при которых бактериологический метод может показать отрицательный результат. Однако работа таким методом требует хорошо оснащенных, современных лабораторий, которых, к сожалению, не имеют многие небольшие города и поселки городского типа.

Самыми быстрыми и точными видами анализов на обнаружение туберкулезной палочки являются молекулярно-генетические методы диагностики. Это современные комплексы анализов, включающие в себя расшифровку генома микобактерии туберкулеза.

Такие молекулярно-диагностические методы открыли в современной медицине хорошие перспективы на последующее развитие эффективных методик борьбы с этим коварным заболеванием.

Наиболее часто используется способ полимеразной цепной реакции – это тест предназначен для выявления микобактерии в мокроте или установления вида бактерий в культуральных средах.

[attention type=green]

Что имеет первостепенное значение в постановке диагноза — это время: вместе с обработкой материала, идентификация туберкулезной палочки занимает всего 5-6 часов. Кроме того, реакция ПЦР обладает высокой чувствительностью и специфичностью, что является залогом стопроцентно точного результата.

[/attention]

Источник: http://tuberculosis.su/analiz-mokroti-na-tuberkulez.html

Мокрота при туберкулезе

Анализ мокроты больного на туберкулез

Мокрота всегда сопровождает прогрессирующее течение туберкулеза.

Ежедневно железистыми клетками трахеи и крупных бронхов продуцируется небольшое количество слизистого секрета, призванного очистить дыхательные пути от попадающих пылевых частиц и микробных агентов.

При инфицировании легочного дерева количество этого секрета значительно увеличивается, он содержит большое число клеток иммунитета и элементов воспаления.

Такое патологическое отделяемое называется мокротой, и при различных заболеваниях она имеет свои особенности.

Появление мокроты при туберкулезе происходит не сразу. Начальные этапы болезни, как правило, сопровождаются сухим и малопродуктивным кашлем.

Появление гнойного или слизисто-гнойного экссудата связано с прогрессированием инфекционного процесса в лёгких и ростом очагов воспаления.

При этом железистыми клетками бронхов активно продуцируется патологический секрет, который выделяется наружу при каждом кашлевом толчке.

Сухой приступообразный кашель – признак начальных форм специфического воспаления в легких

Мокрота имеет различные характеристики, начиная от цвета и запаха, заканчивая вязкостью и консистенцией. Особенности воспалительного экссудата при туберкулезе представлены в разделах ниже.

Цвет мокроты при туберкулезе

Появление прожилок крови в мокроте – тревожный признак развития деструктивных изменений.

Обратите внимание! По цвету мокроты предположить ее состав бывает трудно.

Состав мокроты при туберкулезе

В зависимости от состава выделяют несколько видов мокроты.

Таблица: Классификация мокроты:

ВидОписаниеЗаболевания
СлизистаяЯвляется следствием простейшего катарального воспаления. Прозрачная. При туберкулезе практически не встречается.
  • Острый бронхит;
  • Бронхиальная астма.
Слизисто-гнойнаяСостоит из слизи и некоторого количества гноя (погибших иммунных клеток). Прозрачная, имеет прожилки жёлтого или зелёного цвета.
  • Начальные формы туберкулёза;
  • Хронический бронхит;
  • Пневмония.
Гнойно-слизистаяИдентична по компонентам с предыдущей, но содержит больше гноя, чем слизи. Имеет желтоватый или зеленоватый оттенок.
ГнойнаяСлизь отсутствует. Цвет мокроты грязно-зеленый или жёлтый.
  • Туберкулёз;
  • Инфекционные заболевания дыхательных путей.
Слизисто-кровянистаяИмеет красноватый цвет за счёт прожилок крови в слизистом отделяемом.
  • Туберкулёз;
  • Пневмония;
  • Бронхогенный рак.
Слизисто-гнойно-кровянистаяПомимо крови и слизи также имеет в составе гной.
КровохарканьеВыделение большого количества крови алого оттенка из дыхательных путей.
  • Туберкулёз с распадом;
  • Опухоли;
  • Травмы лёгкого.

Стандартная врачебная инструкция рекомендует провести несколько лабораторных тестов для определения основных физико-химических свойств отделяемого из бронхов.

Консистенция

По консистенции мокрота при инфицировании микобактериями туберкулёза может быть: Вязкой (содержит много слизи и белых кровяных телец). Чаще встречается на начальных этапах заболевания.

Густой (небольшое количество слизи и лейкоцитов, а также жидкости). Определяется при инфильтративном туберкулезе. Жидкой (содержит много влаги и мало форменных элементов).

Мокрота – важный диагностический материал

Патологический секрет бронхов является одним из основных материалов для исследования в диагностике туберкулёза. Она позволяет не только подтвердить данные рентгенологического обследования, но и выявить больных с открытой формой инфекции, активно выделяющих МБТ и способных заразить окружающих.

Чтобы повысить диагностическую ценность анализов мокроты, каждому пациенту следует знать правила сбора мокроты на туберкулез.

ПЦР мокрты на туберкулез

Наиболее достоверные результаты в обнаружении микобактерий туберкулёза дают бактериологические методы исследования:

ПЦР-диагностика туберкулёза и современные иммуноферментные способы диагностики.

Показания:

диагностика туберкулёза; дифференциальная диагностика заболевания органов дыхания при подозрении на туберкулёз.

Подготовка

Для исследования собирается утренняя мокрота, которая выделяется во время приступа кашля.

Перед откашливанием необходимо почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой с целью удаления остатков пищи, слущенного эпителия и микрофлоры ротовой полости.

В контейнер не должна попасть слюна и носоглоточная слизь.

Контейнер плотно закрыть и промаркировать.

Мокроту желательно собирать до приёма пищи.

Интерпретация результатов анализа мокроты на туберкулез

В норме микобактерии туберкулёза в мокроте не выявляются.

Посев мокроты на туберкулез

Посев мокроты необходим, чтобы определить, содержит ли мокрота бактерии, которые вызывают туберкулез. При необходимости, для диагностики туберкулеза проводится быстрый тест на основе ДНК.

Инструкции по сбору мокроты на туберкулез

Мокрота это слизь, откашливаемая из Ваших легких.

Как правило, Вас попросят сдать три образца мокроты.

  • Соберите Вашу мокроту утром первым делом в течение трех дней подряд. Соберите один образец каждое утро.
  • Во время сбора мокроты находитесь далеко от других людей. Если возможно, идите на улицу или откройте окно во время сбора мокроты.

Сделайте глубокий вдох.

Удержите воздух в течение нескольких секунд. Выдохните медленно.

Сделайте следующий глубокий вдох.

Кашляйте сильно пока мокрота (не слюна) не попадет к Вам в рот.

Сплюньте мокроту в контейнер для образцов, которая имеет завинчивающуюся крышку.

Плотно закройте крышку контейнера для образцов.

Проверьте, что бирка с Вашей личной информацией, прикреплена на дно каждого контейнера.

Положите каждый контейнер с мокротой в отдельный прозрачный пластиковый пакет и герметично закройте их.

Храните контейнеры с мокротой в холодильнике. Отнесите контейнеры в лабораторию

в тот день, когда Вы будете иметь все три образца.

  • Общий анализ мокроты норма показателей

Источник: https://MedAnalises.net/LabAnalis/mokrota/mokrota-tuberkulez.html

Анализ мокроты на туберкулез: отрицательный и положительный

Анализ мокроты больного на туберкулез

Анализ мокроты на туберкулез: отрицательный и положительный.

Туберкулез и пути распространения инфекции.

Туберкулез – инфекционное заболевание, которое вызывается микобактериями туберкулеза, кислотоустойчивыми грамположительными палочками.

В наше время эта болезнь настолько распространена, что приобрела характер эпидемии.

Туберкулез – это болезнь, которая поражает не только органы дыхания, как мы привыкли думать, под прицелом микобактерий также могут оказаться почки, кости, кишечник, мозг.

Пути заражения и передачи туберкулеза

Заболеваемость среди людей, которые имели непосредственный длительный контакт с бактериовыделителями, в 3-5 раз больше, чем среди людей, у которых таких контактов не наблюдалось.

Также большая заболеваемость обнаруживается среди детей, которые имели постоянные контакты с бактериовыделителями.

Микобактерии туберкулеза способны проникать в организм человека различными путями, а именно — воздушно-капельным и пылевым – так называемым « аэрогенным», алиментарным (с продуктами питания, которые получили от животных, болеющих туберкулезом), контактным и герминативным (внутриутробно).

Как известно, основной путь передачи возбудителей туберкулеза — аэрогенный, что составляет 95-97% всех заражений туберкулезом.

[attention type=yellow]

То есть, микобактерии от больного человека могут распространяться с его слюной во время разговора, чиханья, кашля.

[/attention]

Но не стоит бояться таких людей, нет необходимости ездить в общественном транспорте в марлевой маске и избегать любых контактов, ведь вероятность заражения зависит от формы туберкулеза, а также количества возбудителей в единице объема воздуха и восприимчивости вашего организма.

Ведь наш иммунитет для того и существует, чтобы быть на страже и уничтожать всех патогенных микробов, которые атакуют организм.

К тому же попадание возбудителя в организм обуславливает заражение, но не во всех случаях вызывает заболевание.

Как известно, для передачи инфекции необходимо, чтобы туберкулезный больной выделял заразные частички в воздух, это возможно, как правило, при туберкулезе органов дыхания.

Но не все больные одинаковой мерой могут распространять болезнь.

Прежде всего это будет зависеть от количества микобактерий в бронхиальном секрете больного.

Причем существует прямая корреляция между количеством микобактерий туберкулеза в мокроте и контагиозностью, то есть, степенью заражения.

Анализ мокроты больного туберкулезом

Мокрота больного – это смесь бронхиального секрета, слюны, а также некротизированной легочной ткани.

Для получения адекватных результатов анализа, необходимо правильно собрать мокроту.

Обычно она собирается утром, после полоскания рта, путем откашливания содержимого верхних дыхательных путей в стерильную емкость. Если мокроты мало, ее собирают на протяжении дня.

[attention type=red]

Начинают анализ мокроты с макроскопического исследования, то есть, оценивают ее количество, характер (слизистый, гнойный, слизисто-гнойный, кровянистый), запах, гомогенность.

[/attention]

У туберкулезных больных мокрота обычно слизистая, без запаха и патологических примесей.

После макроскопического анализа, проводят микроскопический анализ мокроты.

Каким же методом можно определить наличие или отсутствие возбудителей туберкулеза в мокроте больного?

Прежде всего это бактериоскопическое исследование. Готовят мазок мокроты больного, проводят окрашивание по Цилю-Нильсену, высушивают и исследуют под микроскопом.

Этот метод помогает выявить микобактерии при том условии, что в 1 мл мокроты содержится от 5000 до 10000 бактерий.

При незначительном содержании микробов, этот метод не является достаточно эффективным.

Бактериоскопию проводят на протяжении трех дней, после чего применяют метод флотации.

Данный метод основывается на том, что готовят суспензию углеводородов (ксилол, бензол) и мокроты больного.

[attention type=green]

Таким образом, на поверхности оказывается пена с микобактериями, ее снимают и наносят на предметное стекло около 5-6 раз, затем окрашивают по Цилю-Нильсену и исследуют под микроскопом.

[/attention]

Этот способ увеличивает чувствительность метода бактериоскопии на 10-13%.

Большей эффективностью обладает метод люминисцентной бактериоскопии, суть которого состоит в том, что микобактерии окрашивают специальными красителями — флюорохромами, после чего первые приобретают способность светиться в ультрафиолетовом свете.

Методы анализа мокроты на туберкулез

Такой метод, как фазово-контрастная микроскопия, позволяет обнаруживать и исследовать палочки туберкулеза и их формы в нативном состоянии.

Для выполнения этого исследования необходимо специальное фазово-контрастное оборудование.

Цитологический метод исследования делает возможным выявление в мокроте нейтрофилов, мононуклеаров, казеозного некроза и гигантских клеток Лангханса, которые свидетельствуют о специфическом типе воспаления в легочной ткани.

В случае недостаточного количества мокроты, или ее отсутствия, больному показаны раздражающие ингаляции 15 %-ного раствора хлорида натрия в 1%-ном растворе соды, либо смыв с бронхов.

В последнем случае больному выполняют анестезию корня языка и задней стенки глотки раствором анестетика, затем шприцем вливают в трахею 10-15 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия.

У больного рефлекторно начинается кашель, и он выкашливает изотонический раствор в чашку Петри.

Затем проводят бактериоскопию и дальнейшее изучение биоматериала.

Следующий метод, который используют для анализа мокроты – бактериологический.

Его суть состоит в посеве исследуемого материала на питательные среды с дальнейшей дифференциацией микобактерий, определением чувствительности выделенных микробов к противотуберкулезным препаратам.

Его недостаток состоит в том, что первые колонии на питательной среде могут появиться лишь спустя 2-3 месяца, что значительно затрудняет диагностический поиск.

Как бактериоскопический, так и бактериологический анализ мокроты проводят трехкратно (3 дня подряд) до начала противотуберкулезной терапии.

[attention type=yellow]

Еще одним методом анализа является биологический метод. При этом патологический материал от больного прививается лабораторным животным, например в брюшную полость.

[/attention]

Если в материале присутствовали микобактерии, животные заболевают туберкулезом и гибнут через несколько месяцев.

Современные методы анализа биоматериала

К более быстрым методам определения возбудителей туберкулеза в исследуемого материале является метод индикаторной пробирки BBL MGIT (Micobacteria Growth Indicator Tube).

Такие пробирки содержат питательный бульон и флюоресцентное вещество, микобактерии поглощают кислород с бульона, соединение реагирует на уровень кислорода в пробирке и наблюдается явление флюоресценции.

Изначальный уровень кислорода в пробирке свечения не вызывает.

Сегодня достаточно эффективными являются методы молекулярной диагностики, такие как ПЦР-диагностика и метод ДНК-зондов.

Основаны на выявлении мельчайших частиц ДНК возбудителей в исследуемом материале. Эти методы имеют наибольшую чувствительность и позволяют выявить микроорганизмы в течение короткого времени (от 2 часов до 2 суток).

Так же в стадии исследований сейчас находятся методы выявления возбудителей туберкулеза с помощью моноклональных антител, что так же является более быстрым способом, чем тот же бактериологический метод.

На сегодняшний день методы, позволяющие определять наличие микобактерий в организме человека, постоянно разрабатываются и совершенствуются, что в скором времени приведет к улучшению диагностики, а таким образом и лечения туберкулеза.

по теме

Источник: https://tuberkulezstop.ru/analiz-mokroty-tuberkulez/

Метод исследования мокроты на туберкулёз

Анализ мокроты больного на туберкулез

Палочки размножаются в лёгких, образуют там колонии, выделяются при кашле, именно поэтому исследование мокроты – важный диагностический этап.

Лабораторная диагностика делается в основном микроскопическим, микробиологическим методом, бактерии культивируют на плотных средах Левенштейна-Йенсена или Финна-II, окрашивание выполняют по Цилю-Нильсену.

Есть и другие технологии, но все они не идеальны, имеют свои преимущества и недостатки.

Общие сведенья о туберкулёзе

Туберкулёз легких называют ещё чахоткой, что является устаревшим названием. Возбудитель – различные представители вида Mycobacterium tuberculosis complex, которых ещё называют палочками Коха (в честь первооткрывателя).

Бактерии туберкулёза поражают в основном лёгкие, где образуют многочисленные колонии. Именно поэтому можно исследовать мокроту на наличие возбудителя.

Также они формируют туберкулы – полые узелки из соединительной ткани, внутри которых находится гной и масса бактерий.

Ценность лабораторной диагностики мокроты

Лабораторное исследование мокроты довольно редко проводится для обнаружения людей, заражённых туберкулёзом. Чаще применяется для подтверждения диагноза, анализа состояния пациента, подстройки лечения, дозировки при химиотерапии, контроля результатов терапии. То есть оценка мокроты является постоянным необходимым способом исследования.

К лабораторной диагностике относится множество методов:

  • макроскопия;
  • микроскопия;
  • иммуноферментный анализ;
  • флуоресцентная микроскопия;
  • полимеразная цепная реакция;
  • культивирование.

Показанием к исследованию мокроты лабораторными методами являются признаки туберкулёза:

  • гипертермия;
  • длительный продуктивный кашель;
  • затемнения на флюорографии.

К достоинствам технологии относят следующие факты:

  • результат можно получить достаточно быстро при ПЦР и микроскопии;
  • установить точный штамм бактерии;
  • проконтролировать влияние химиотерапии или антибиотиков.

Минусы анализа мокроты следующие:

  • при скрытой форме туберкулёза бактерии не выделяются при кашле, из-за чего результат лабораторной диагностики будет отрицательным;
  • мокроту довольно трудно собрать, для этого нужна специальная герметичная ёмкость;
  • некоторые методы (культивирование) довольно длительные – более месяца.

Сбор мокроты

Можно брать экссудат следующего рода:

  • материал после ингаляции небулайзером;
  • промыванием бронхов специальными растворами;
  • мокрота из альвеол;
  • получение слизи при бронхоскопии;
  • взятие биоптата их трахеи, бронхов или плевры;
  • мокрота из бронхов;
  • мазки с гортани.

Мокроту собирают в плотно закрывающиеся стерильные и герметичные ёмкости. Это нужно для снижения вероятности занесения микробов в окружающий мир.

Ёмкости должны соответствовать следующим требованиям:

  • делаться из ударопрочного материала;
  • иметь хорошую прозрачность для возможности визуальной оценки качества и количества мокроты;
  • расплавляться при температуре 40-45 градусов;
  • иметь объём не меньше 40-50 мл;
  • отверстие должно быть шире 3 см.

Результативность и достоверность исследования мокроты зависит от правильности её сбора, соблюдения рекомендаций, которые должны минимизировать вероятность загрязнения материала. Кроме того, откашливание производится в герметичной комнате, так как данная процедура опасна для всех окружающих.

Что нужно знать при сборе мокроты?

При сборе материала нужно соблюдать ряд правил:

  • откашливание мокроты во флакон делается до начала химиотерапии;
  • также его проводят обязательно с утра, до завтрака и приёма препаратов;
  • при исследовании берут 3 пробы (каждый раз откашливая в новую ёмкость) в течение 3 суток подряд;
  • материал сразу же отвозят в лабораторию (в течение часа). В идеале она должна находиться в одном здании с туберкулёзным стационаром;
  • при невозможности это сделать пробу ставят в холодильник при +4оС, но держать там можно не более 2 суток;
  • крайне важно следить за целостностью ёмкостей. Нарушение герметичности приводит не только к порче пробы, но и к опасному заражению окружающей среды;
  • объём одной пробы должен составлять 3-5 мл;
  • медицинский работник обязательно одевает халат, шапку, медицинскую маску, резиновые перчатки и специальный фартук;
  • больному нужно откашливать не слюну или слизь из носа и глотки, а именно мокроту из нижних отделов бронхов. Для создания продуктивного кашля можно сделать 2-3 глубоких вдоха;
  • перед откашливанием рот тщательно промывают водой, чтобы удалить естественную микрофлору и кусочки пищи;
  • ёмкость держат у самых губ, после откашливания мокроту сразу сплёвывают;
  • медицинский работник стоит сзади больного, чтобы мокрота не попала на него. Его задача – контролировать правильность сбора материала;
  • после сбора слизи флаконы сразу герметично запечатывают;
  • если больному трудно откашливать мокроту, то накануне вечером, а также рано утром перед сбором слизи пациенту даёт отхаркивающие препараты.

Режим сбора материала для лабораторного анализа на туберкулёз легких зависит от стадии развития и лечения заболевания:

  1. При первом поступлении в течение 3 суток делают по 3 пробы ежедневно.
  2. Во время лечения ежемесячно собирают 3 пробы за раз.
  3. На долечивании каждые 2-3 месяца берут 2 пробы мокроты.

Методы диагностики

Исследование мокроты делается множеством способов. У каждого метода есть свои преимущества и недостатки, выбор технологии диагностики зависит от решения врача и оснащения больницы.

Макроскопический анализ

Характер мокроты зависит от стадии туберкулёза лёгких:

  1. При инфицировании на латентной стадии мокроты может не быть, или она имеется, но в минимальном количестве и обладает белым цветом или прозрачностью.
  2. При развитии клинической стадии мокрота приобретает выраженный гнойный характер, оттенок меняется на серый, жёлтый или зелёный, появляется неприятный запах.
  3. На более поздних стадиях, при появлении рецидивов в мокроте обнаруживаются прожилки крови.

Микроскопический анализ

Наиболее быстрый, простой и дешёвый способ оценки материала на туберкулёз легких. За счёт этого может применяться для постановки диагноза, однако он не имеет достаточно высокой надёжности, поэтому его сочетают с флюорографией. Используется для оценки состояния больного в процессе лечения.

Применяется 2 метода:

  1. Прямая микроскопия. Материал готовится непосредственно из мокроты.
  2. Микроскопия осадка. Материал концентрируется с помощью центрифугирования.

Для 50% достоверности метода нужно минимум 5000 бактерий на мл мокроты.

Для увеличения надёжности способа исследуют минимум 3 пробы материала. Получение отрицательного результата не означает отсутствие туберкулёза, так как мокрота может содержать очень малое количество возбудителей из-за закрытой формы.

Окраска делается по Цилю-Нельсену:

  1. В материал вносится карболовый фуксин при повышенной температуре и протравливании фенолом, который проникает во все бактерии препарата.
  2. Препарат обесцвечивается 25% серной кислотой и 3% солянокислым спиртом. Из-за восково-липидной мембраны палочки Коха не подвергаются воздействию кислот, поэтому они сохраняют окраску.
  3. Остальные микробы подкрашиваются 0,3% метиленовой синью. Бактерии туберкулёза не восприимчивы к анилиновым краскам, из-за этого цвет у них не меняется.

В итоге палочки Коха приобретают красный цвет, а все остальные клетки – синий. Препарат надо рассматривать через световой бинокулярный иммерсионный микроскоп с тысячекратным увеличением. Для постановки диагноза обычно хватает 100 полей зрения. При отсутствии бактерий рекомендуется просмотреть ещё 200 полей.

Иммуноферментный анализ

Метод основан на реакции антигена и антитела. Антитела – специфические иммуноглобулины, которые образуются в ответ на проникновение бактерий и вирусов. Антиген – протеины, вызывающие выработку иммуноглобулинов.

Проводится в 2 этапа:

  1. Берётся антитело, меченное каким-либо веществом. Оно добавляется в материал, где присутствует антитело. В ходе реакции образуется единый комплекс.
  2. Добавляется фермент, который меняет цвет меченных комплексов антиген-антитело. Интенсивность окраски материала указывает на количество иммуноглобулинов.

Автоматизированная система ВАСТЕС MGIT 960

ВАСТЕС MGIT960 – автоматизированный прибор на 960 проб, который самостоятельно проводит исследование материала. Суть метода состоит в следующем:

  1. В ёмкость вносится флюоресцирующий материал, флуоресцентные свойства которого блокируются с помощью кислорода.
  2. Бактерии при своей жизнедеятельности поглощают кислород, уменьшают его количество.
  3. Из-за снижения концентрации усиливаются флуоресцентные свойства материала. Оно регистрируется в автоматическом режиме.

Первые результата регистрируются на 4-5 день, а для достижения максимума нужно 11 суток.

Флуоресцентная микроскопия

Люминесценция позволяет поднять результативность исследования на 10-15%, а требуемое время на это снизить в 2-3 раза. Применяют флуоресцентные краски: аурамин и родамин.

Их действие связано со способностью вступать в реакцию с воскоподобными веществами бактериальной мембраны возбудителя.

При облучении ультрафиолетом окрашенные таким способом палочки Коха начинают светиться оранжевым или красным цветом, при том, что остальной материал имеет чёрный или тёмно-зелёный оттенок.

[attention type=red]

Важно! Недостатком является сравнительно высокая стоимость метода.

[/attention]

Из-за того, что бактерии в препарате становятся очень яркими и контрастными, то можно уменьшить расширение микроскопа в 4-10 раз, сократив тем самым необходимое время на исследование материала. К тому же флуоресцентная окраска при соотнесении с окрашиванием по Цилю-Нельсену может дать информацию, сколько бактерий потеряло кислотоустойчивые свойства вследствие химиотерапии.

Полимеразная цепная реакция

Метод основан на увеличении количества ДНК возбудителя в материале в 100-110 раз за счёт специальных ферментов. Данный способ применим лишь для тех микробов, у которых точно установлен состав нуклеотидной последовательности. В отличие от копирования ДНК в результате деления клеток при ПЦР создаются лишь обрывчатые короткие участки ДНК.

Метод имеет множество преимуществ:

  • для положительного результата достаточно 10-100 бактерий в пробе;
  • абсолютная специфичность, так как метод применяется для конкретной ДНК;
  • результат становится известным через 4-5 часов.

Тем не менее, из-за высокой чувствительности метода возможны ложноположительные результаты, что является существенным минусом. Диагностика проводится с помощью амплификатора – специального прибора, в котором проходит реакция. Он создаёт условия для ПЦР и может использоваться для хранения препарата.

Культивирование на средах

Для культивирования рекомендуется плотная среда. На западе используется состав Левенштейна-Йенсена, который даёт колонии через 15-25 суток.

В России применяют среду Финна-II, которая уменьшает срок получения результата на 2-3 дня и увеличивает вероятность появления колонии на 6-8%. Однако при любой среде рекомендуется посев минимум 2-3 материалов.

Связано это с тем, что даже при нескольких пробах нет точной гарантии достоверности результата. Установлено, что при 6 посевах вероятность обнаружения туберкулёза увеличивается на 7-8%.

Заключение

Исследование мокроты при лечении туберкулёза – обязательное условие для контроля состояния пациента.

Сбор слизи должен соответствовать всем требованиям, иначе будет портиться материал, появиться опасность заражения. Анализ можно проводить разными методами, каждый из которых имеет свои плюсы и минусы.

При исследовании желательно сочетать сразу несколько технологий, чтобы повысить достоверность.

Источник: https://ChahotkiNet.ru/diagnostika/analizy/metod-issledovaniya-mokroty

Ваш доктор
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: